Sodyum Sitrat Tamponu Yapmanın Basit Adımları

Sodyum sitrat tamponu, RNA izolasyonu için sıklıkla kullanılır, çünkü RNA ipliklerinin baz hidrolizini en aza indirir, bu da sırasında mRNA saflaştırması için paha biçilmez kılar genomik araştırma ve transkripsiyon okumak için. Sitrat bazlı tamponlar ayrıca sabit doku preparatlarındaki antijenlerin saptanmasına yardımcı olur, çünkü antijenler ve fiksasyon ortamı arasında oluşan çapraz bağlantıları koparırlar.

Aşağıdaki kolay adımlarla, 10 dakikadan daha az bir sürede pH (asidik) olan bir sodyum sitrat tamponu oluşturulabilir.

Sodyum sitrat tamponunu yapmak için birkaç malzeme gereklidir. Sitrik asit ile sadece 1M sodyum hidroksit, damıtılmış su ve kalibre edilmiş bir pH probu gerekir. Sodyum sitrat isteğe bağlıdır.

Tamponun yapılması için ayrıca 1 litrelik dereceli silindir, 1 litrelik hacimsel bir şişe ve üç adet 1 litrelik ortam şişesi gerekir. Son olarak, manyetik bir karıştırma çubuğuna ve manyetik bir karıştırıcıya ihtiyacınız olacaktır. Bu materyallerin tümü okulda bulunabilir,

Erişilebilir malzemelere bağlı olarak sodyum sitrat tamponları yapmak için iki yöntem vardır.

1. Hem sitrik asit hem de konjugat bazınız varsa, 21 gram karıştırarak her biri için bir stok solüsyonu oluşturun. 1 litre distile su içinde sitrik asit ve 1 litre distile içinde 29.4 gram sodyum sitrat Su.
2. Sadece elinizde sitrik asit varsa, 1 litre damıtılmış suyun hemen altında 2.1 gram karıştırın.

82 mililitre sitrik asit çözeltisini 18 mililitre sodyum sitrat çözeltisi ile karıştırın. Buna, karışımın hacmini 1 litrenin biraz altına getirmek için yeterli miktarda damıtılmış su ekleyin.

Çözeltiyi manyetik bir karıştırıcı ile hafifçe karıştırırken, karışımın pH'ını 6.0'a ayarlamak için İM sodyum hidroksit kullanın. Daha sonra, hacimsel bir şişeyle, çözeltinin nihai toplam hacmini tam olarak getirmek için daha fazla damıtılmış su ekleyin 1 litre.