Tampon çözeltiler "Asit" terimi, hem zayıf bir asit hem de bunun konjugat bazını içeren su bazlı sıvılardır. Kimyasalları nedeniyle tampon çözeltiler, kimyasal değişiklikler olsa bile pH'ı (asitliği) neredeyse sabit bir seviyede tutabilir. Tampon sistemler doğada bulunur, ancak kimyada da son derece faydalıdır.
Tampon Çözeltilerin Kullanım Alanları
Organik sistemlerde, doğal tampon çözeltileri pH'ı tutarlı bir seviyede tutar ve biyokimyasal reaksiyonların organizmaya zarar vermeden gerçekleşmesini mümkün kılar. Biyologlar biyolojik süreçleri incelediğinde, aynı tutarlı pH'ı muhafaza etmelidirler; bunun için hazırlanmış tampon çözeltileri kullandılar. Tampon çözeltiler ilk olarak 1966'da tarif edildi; bugün aynı tamponların birçoğu kullanılmaktadır.
Yararlı olması için biyolojik tamponların çeşitli kriterleri karşılaması gerekir. Spesifik olarak, suda çözünür olmalı ancak organik çözücülerde çözünmemelidir. Hücre zarlarından geçemezler. Ek olarak, kullanıldıkları deneyler boyunca toksik olmayan, etkisiz ve kararlı olmalıdırlar.
Tampon çözeltiler kan plazmasında doğal olarak bulunur, bu nedenle kan 7.35 ila 7.45 arasında tutarlı bir pH tutar. Tampon çözeltiler ayrıca şu alanlarda kullanılır:
- fermantasyon süreçleri
- ölen kumaşlar
- kimyasal analiz
- pH metrelerin kalibrasyonu
- DNA ekstraksiyonu
Tris Tampon Çözeltisi Nedir?
Tris, izotonik olduğu ve toksik olmadığı için salin içinde sıklıkla kullanılan kimyasal bir bileşik olan tris (hidroksimetil) aminometan için kısadır. Tris'in pKa değeri 8.1 ve pH seviyesi 7 ile 9 arasında olduğundan, Tris tampon çözeltileri de DNA ekstraksiyonunu içeren bir dizi kimyasal analiz ve prosedürde yaygın olarak kullanılmaktadır. Tris tampon çözeltisindeki pH'ın, çözeltinin sıcaklığı ile değiştiğini bilmek önemlidir.
Tris Tamponu Nasıl Hazırlanır
Piyasada bulunan tris tampon çözeltisini bulmak kolaydır, ancak uygun ekipmanla kendiniz yapmak mümkündür.
Malzemeler:
İstediğiniz çözeltinin molar konsantrasyonuna ve ihtiyacınız olan tampon miktarına göre ihtiyacınız olan her bir öğenin miktarını hesaplayın.
- tris (hidroksimetil) aminometan
- distile deiyonize su
- HCl
Prosedür:
- Hangi konsantrasyonu (molarity) ve yapmak istediğiniz Tris tamponunun hacmi. Örneğin, salin için kullanılan Tris tampon çözeltisi 10 ila 100 mM arasında değişir. Ne yaptığınıza karar verdikten sonra, tamponun molar konsantrasyonunu yapılan tamponun hacmiyle çarparak gerekli olan Tris mol sayısını hesaplayın. (Tris mol = mol / L x L)
- Daha sonra, mol sayısını Tris'in (121.14 g / mol) moleküler ağırlığı ile çarparak bunun kaç gram Tris olduğunu belirleyin. gram Tris = (mol) x (121.14 g / mol)
- Tris'i, istenen nihai hacmin 1/3 ila 1'i kadar damıtılmış iyonu giderilmiş suya eritin.
- HC1 (örn., 1M HC1) içinde pH ölçer Tris tampon çözeltiniz için istenen pH değerini verir.
- İstenen nihai çözelti hacmine ulaşmak için tamponu suyla seyreltin.
Çözelti hazırlandıktan sonra, aylarca oda sıcaklığında steril bir yerde saklanabilir. Tris tampon çözeltisinin uzun raf ömrü mümkündür, çünkü çözelti herhangi bir protein içermez.