RFLP ve DNA Analiz Uygulamaları

Kısıtlama Fragman Uzunluğu Polimorfizmi (RFLP), bireylerin özgün kalıplarına göre tanımlanmasına izin veren moleküler bir genetik analiz yöntemidir. Kısıtlama enzimi DNA'nın belirli bölgelerinde kesim.

RFLP Analizi olarak da adlandırılan teknik, polimorfizmleri bireylerin genetik kodlarında. Bir türün tüm üyeleri esasen aynı genetik yapıya sahip olsa da, bu küçük farklılıklar bireyler arasında görünüm veya metabolizma gibi fenotipteki varyasyonları açıklar.

RFLP analiz tekniği, belirli bir bölgenin DNA bilinen değişkenlikte, kısıtlama enzimleriyle, daha sonra DNA fragmanlarının agaroz jel elektroforezi ile ayrılması ve fragmanların sayısının ve nispi büyüklüklerin belirlenmesi.

Bir kısıtlama enzimi, kısıtlama bölgelerinde DNA'yı kesen bir enzim, bir protein molekülüdür. Özünde, DNA örneği kısıtlama enzimleri tarafından parçalanır ve sindirilir. Elde edilen fragmanlar uzunluklarına göre ayrılır ve fragman boyutlarının paterni test edilen her birey için farklı olacaktır.

Tam RFLP işlemi prob etiketlemesi, DNA parçalanması, elektroforez, lekeleme, hibridizasyon, yıkama ve otoradyografi gerektirir. Tespit edilen RFLP, otoradyografide X-ışını filmi kullanılarak görselleştirilir; burada DNA fragmanları birbirlerinden elektroforez ile ayrıldıktan sonra görüntülenebilir ve analiz edilebilir.

RFLP analizi için bazı uygulamalar şunlardır:

• DNA parmak izi: Adli bilim adamları, suç mahallinde toplanan kanıt örneklerine dayanarak şüphelileri tanımlamak için RFLP analizini kullanabilirler.
• Babalık: RFLP, babalık tespitinde veya soyları izlemek için de kullanılır.
• Genetik Çeşitlilik: Teknik, vahşi yaşamın evrimi ve göçünü incelemek, hayvan popülasyonlarındaki üreme modellerini ve bazı hastalıkların tespitini ve teşhisini incelemek için kullanılabilir.

Genomlarda varyasyonun RFLP tespitini kullanma tekniği, genom haritalaması ve genetik hastalık analizinde hayati bir araçtır. Belirli bir hastalık geninin yeri belirli bir kromozomda aranıyorsa, araştırmacılar hastalığı olan bir ailenin üyelerinin DNA'sını analiz edin, sonra RFLP'de benzer kalıtım kalıplarını arayın aleli.

Bir hastalık geni lokalize olduğunda, diğer aile üyeleri üzerinde RFLP analizi yapmak mutant genlerin bir taşıyıcısını ortaya çıkarabilir veya genel hastalık riskini işaret edebilir. RFLP tekniğinin, adli bilimlerde ve diğer bazı alanlarda DNA analizi için daha yeni, daha sağlam tekniklerin kullanıldığı günümüzde yaygın olarak kullanılmadığına dikkat etmek önemlidir.

Ne yazık ki, RFLP analiz tekniği sıkıcı ve yavaştır. Çok miktarda örnek DNA gerektirmesinin yanı sıra, numunenin genellikle yaklaşık dörtte biri kadar olması gerekir. DNA örnekleri için nispeten büyük - prob etiketlemeden yıkama ve otoradyografiye kadar olan süreç bir aya kadar sürebilir tamamlayınız.

İnsan Genom Projesinin sonuçları RFLP ihtiyacının hemen hemen yerini almıştır. Proje, insan hücrelerinde, insan genomunda bulunan DNA'nın tüm sekansını belirlemeye ve insan genomundaki tüm genleri tanımlamaya izin verdi.